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将核酸样品与3×甲酰胺凝胶上样缓冲液按体积比2:1混合,例如,5 μL核酸样品加入2.5 μL缓冲液

碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液(10×)是一种10倍浓缩的碱性DNA电泳缓冲液,主要由0.5 M NaOH和10 mM EDTA组成,呈强碱性。它广泛应用于碱性琼脂糖凝胶电泳实验中。产品特性成分:主要由0.5 M NaOH和10 mM EDTA组成。保存条件:室温保存,有效期为12个月。用途:主要用于碱性琼脂糖凝胶电泳。包装:通常以500 mL包装提供。使用方法稀释:使用无菌蒸馏水或去离子水将10×缓冲液稀释至1×工作液。制备琼脂糖凝胶:在三角烧瓶或玻璃瓶中加入准确量的琼脂糖粉和定量的水。加热使琼脂糖完全溶解,注意搅拌防止烧焦。冷却至55°C后,加入0.1倍体积的10×碱性凝胶电泳缓冲液,迅速灌制凝胶。电泳操作:将稀释后的1×缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加入样品后开始电泳,建议使用小于3.5 V/cm的电压。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。废弃物处理:使用后的废弃物应按照相关法律法规进行处理。

样品混合:将 2 μL 的 3×甲酰胺凝胶上样缓冲液与 4 μL 的核酸样品混合。

DNA Marker VI是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为250 bp、1000 bp、2500 bp、5000 bp、7000 bp和10000 bp。其中,2500 bp条带的浓度较高(约100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳,使用方便。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件: 凝胶浓度:建议使用1.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。保存条件短期保存:4℃可保存6个月。长期保存:-20℃可保存至少2年。

使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合

Bst DNA Polymerase, Large Fragment 是一种来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)的重组酶,具有5′→3′ DNA聚合酶活性和强大的链置换能力,但不具有5′→3′核酸外切酶活性。这种酶在等温扩增技术中表现出色,尤其适用于环介导等温扩增(LAMP)和滚环扩增(RCA)等应用。功能与特性链置换能力:Bst DNA Polymerase, Large Fragment 具有强大的链置换能力,能够在等温条件下高效扩增DNA。高耐盐性:该酶在高盐环境中表现出良好的活性,适合处理复杂的生物样本。 高灵敏度:能够在低浓度模板下实现高效的DNA扩增。热稳定性:最佳活性温度为65℃,可在60-70℃的温度范围内稳定工作。应用场景环介导等温扩增(LAMP):用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。滚环扩增(RCA):用于DNA的高效率扩增。高GC含量DNA测序:适用于高GC含量的DNA模板的测序。全基因组扩增(WGA):用于微量DNA模板的快速扩增。

Fast Pfu酶的扩增速度是普通Pfu酶的数倍,72℃下30秒即可延伸1kb以上大大缩短了反应时间

在分子生物学实验中,DNA的完整性和准确性是实验成功的关键。Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶,广泛应用于PCR反应和其他DNA合成实验中。然而,传统的UDG在反应结束后需要额外的处理步骤来失活酶活性,以防止对后续实验的干扰。热敏感型UDG(Heat-labile UDG,1U/μl)的出现,为这一问题提供了高效的解决方案。 热敏感型UDG的独特特性 热敏感型UDG(Heat-labile UDG)是一种经过工程改造的UDG,来源于细菌。与传统的UDG不同,这种酶在高温条件下(通常在95℃)会迅速失活。这一特性使其在PCR反应中具有显著优势。在反应开始前,UDG可以有效去除引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在PCR反应的高温变性步骤中,UDG会自动失活,无需额外的处理步骤,从而简化了实验流程。 热敏感型UDG的应用 热启动PCR:在PCR反应中,热敏感型UDG可以用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在反应前加入UDG,可以降解引物中的尿嘧啶,从而避免引物在反应前的非特异性结合。

在琼脂糖凝胶电泳中,GoldenView 与核酸结合后能产生强烈的荧光信号,其灵敏度与溴化乙锭相当

在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,某些qPCR仪器(如ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了高效的探针法qPCR反应体系和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。 低浓度ROX的必要性 在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。某些qPCR仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)中的ROX浓度经过精确调整,适用于这些需要低浓度ROX的仪器,同时避免了高浓度ROX可能带来的背景荧光干扰。 产品特点 优化的反应体系:Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及其他必要的成分。

通过对比不同GC含量和引物Tm值的体系,该试剂盒在多种复杂条件下均能保持高特异性,生成清晰的扩增曲线

在荧光定量PCR(qPCR)实验中,SYBR Green染料因其高灵敏度和广泛的适用性而被广泛使用。然而,某些qPCR仪器(如某些型号的ABI仪器)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了SYBR Green的高效性和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。 低浓度ROX的必要性 在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。然而,并非所有qPCR仪器都需要高浓度的ROX。某些仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为了满足这些仪器的需求而设计的。 产品特点 优化的反应体系:SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及低浓度的ROX参考染料。

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