该缓冲液主要用于核酸(DNA 和 RNA)的琼脂糖凝胶电泳,适用于多种核酸样品的分析和检测。
BPTE电泳缓冲液(1×, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由PIPES、TRIS、EDTA等成分组成,经过0.1% DEPC处理,确保无RNase污染。产品特性无RNase污染:经过DEPC处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。即用型设计:1×浓度,无需稀释,直接使用。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。pH值稳定:最终pH值约为6.5,适合RNA的稳定迁移。使用方法准备凝胶:根据实验需求,制备琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。加入缓冲液:将BPTE电泳缓冲液(1×, RNase free)加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。 电泳条件:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间根据RNA片段大小调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如Goldview或EB)染色,在紫外灯下观察RNA条带。
尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。
Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。 泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯
在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段。
核酸内切酶VIII(Endonuclease VIII,Endo VIII)是一种具有N-糖基化酶活性和AP-裂解酶活性的DNA损伤修复酶,广泛应用于基因损伤修复研究和相关生物技术领域。 作用原理 核酸内切酶VIII能够识别双链DNA上受损的嘧啶碱基,并在其N-糖基化酶活性作用下切除这些受损碱基,产生一个脱嘌呤(AP)位点。随后,其AP-裂解酶活性会切割AP位点的3'和5'端,产生一个具有3'和5'磷酸的碱基缺口。这种酶能够识别并切除多种受损碱基,包括尿嘧啶、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇等。 产品特性 高纯度:核酸内切酶VIII经过重组表达,纯度高,无核酸外切酶、核酸内切酶以及RNase残留。 热失活:75℃加热10分钟可使酶失活。 反应条件:在10 mM Tris-HCl、75 mM NaCl、1 mM EDTA(pH 8.0 @ 25℃)的缓冲液中,37℃孵育。 应用场景 DNA损伤和修复研究:用于模拟和修复DNA损伤。 单细胞凝胶电泳(彗星试验):用于检测DNA损伤。 NGS建库:在高通量测序建库中修复DNA损伤。 酶法合成DNA:释放DNA链。
试剂盒整合了dUTP/UDG防污染系统,通过在PCR扩增产物中掺入 dUTP,有效避免了假阳性结果
3×甲酰胺凝胶上样缓冲液是一种专门用于核酸电泳的辅助试剂,特别适用于RNA样品的变性电泳。它能够帮助核酸样品在琼脂糖凝胶电泳中更好地沉入加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分该缓冲液的主要成分包括:90% 甲酰胺(Formamide):用于变性核酸,使其保持单链状态。0.075% 二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 0.075% 溴酚蓝(Bromophenol Blue):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。30 mM EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法样品混合:将 2 μL 的 3×甲酰胺凝胶上样缓冲液与 4 μL 的核酸样品混合。变性处理:将混合后的样品在 70℃加热变性 5-15 分钟,然后立即置于冰上冷却,以防止核酸复性。电泳上样:将处理后的样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景3×甲酰胺凝胶上样缓冲液主要用于RNA样品的变性电泳,适用于甲醛变性或非变性的琼脂糖凝胶电泳以及聚丙烯酰胺凝胶电泳。它也可用于寡聚单链DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。
Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 高保真性,快速扩展
磁珠法血液基因组DNA抽提试剂盒是一种基于磁珠分离技术的核酸提取工具,能够从全血、白膜层、血浆等样本中快速、高效地提取高质量的基因组DNA。它结合了磁珠的高效吸附能力和自动化操作的便捷性,广泛应用于分子生物学实验。工作原理该试剂盒利用硅羟基包被的磁珠,在高盐条件下与核酸特异性结合,通过磁场分离去除杂质后,在低盐条件下洗脱得到高纯度的基因组DNA。这种技术避免了传统有机溶剂的使用,更加安全环保。产品特点高效提取:从100 μL到1 mL的血液样本中可提取高质量的基因组DNA,得率高且纯度好。操作简便:整个提取过程可在1小时内完成,适合高通量操作。安全无毒:无需使用酚、氯仿等有机试剂,操作更安全。自动化兼容:可与多种自动化核酸提取仪配合使用,实现高通量提取。应用场景提取的基因组DNA适用于多种下游应用,包括PCR、荧光定量PCR、文库构建、芯片检测、高通量测序等。使用方法样本预处理:加入裂解液和蛋白酶K,65°C孵育以裂解细胞,释放基因组DNA。结合磁珠:加入磁珠,通过磁场分离去除杂质。洗涤与洗脱:用洗涤液去除杂质后,在低盐条件下洗脱DNA。
在使用前,需将 25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液稀释至所需浓度(如 6× 或 5×)。
DNA Marker III是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由7条线状双链DNA片段组成,片段大小分别为200 bp、500 bp、800 bp、1200 bp、2000 bp、3000 bp和4500 bp。其中,1200 bp条带的浓度最高,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取3-6 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。 适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取3-6 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。电泳条件:凝胶浓度:建议使1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。注意事项 琼脂糖质量:建议使用高质量的琼脂糖,以获得更好的电泳效果。电泳缓冲液:使用新鲜配制的电泳缓冲液,避免多次电泳后缓冲液电导增强。保存条件:建议低温保存,以防止核酸酶污染。
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