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胶染法(前染):在制备琼脂糖凝胶时,按 1:10000 的比例加入 4S GelRed 染料

DNA Marker IV是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为500 bp、1000 bp、2000 bp、3500 bp、5500 bp和7000 bp。其中,2000 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取3-6 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰锐利,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取3-6 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。如果加样孔宽度小于5 mm,每次取5 µL即可;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:凝胶浓度:建议使用1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。

通常将 1 μL 的 6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 与 5 μL 的核酸样品混合。

在分子生物学实验中,DNA合成是许多技术的核心,而dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)作为一种特殊的试剂,为DNA合成提供了更多可能性。这种混合液结合了四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dTTP、dGTP)和脱氧尿苷三磷酸(dUTP),为PCR反应和其他DNA合成实验提供了多功能的支持。 dNTP/dUTP Mixture的独特优势 dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)是一种精心设计的混合液,其中每种dNTP的浓度为2.5 mM,而dUTP的浓度为5 mM。这种独特的配方使其在多种实验中表现出色: PCR反应中的应用:在传统的PCR反应中,dNTPs是DNA合成的基本原料。然而,dUTP的加入为PCR反应提供了额外的功能。例如,某些PCR反应需要引入dUTP来标记DNA,或者在后续实验中利用尿嘧啶糖基化酶(UNG)去除dU,从而实现PCR产物的特异性降解。这种混合液能够满足这些特殊需求,同时保持反应的高效性和特异性。

Probe qPCR Mix 采用快速反应体系,能够在短时间内完成扩增反应,大大提高了实验速度

SP6 RNA聚合酶是一种高度特异性的DNA依赖型RNA聚合酶,广泛应用于体外转录实验。它能够以含有SP6启动子序列的双链DNA为模板,催化NTP掺入,合成与模板DNA互补的RNA。 特点 高度特异性:仅识别SP6噬菌体启动子序列,不识别其他生物来源的启动子。 高效合成:能够高效合成多种RNA分子,包括mRNA、siRNA、miRNA等。 兼容修饰核苷酸:可以掺入生物素、荧光素、地高辛等修饰的核苷酸,用于标记RNA。 纯度高:通过SDS-PAGE检测,纯度可达99%,无核酸酶污染。 应用 体外转录:用于合成特定的RNA分子,如mRNA、gRNA、aqRNA等。 RNA探针制备:可用于放射性或非放射性标记的RNA探针合成。 基因表达研究:合成反义RNA用于基因沉默。 RNA结构与功能研究:作为体外翻译的模板或RNA剪接反应的底物。 使用方法 反应条件:通常在37℃下进行,反应体系包括1×转录缓冲液、0.5 mM每种NTP、DNA模板和SP6 RNA聚合酶。 模板要求:推荐使用线性化的质粒或PCR产物作为模板。 保存条件:-20℃保存,避免反复冻融。

In-Fusion Cloning Kit 由Takara公司推出,是市场上最受欢迎的无缝克隆试剂盒

蛋白G-微球菌核酸酶(Protein G-MNase,简称pG-MNase)是Protein G与微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease,MNase)的融合表达产物。它兼具Protein G的抗体结合活性和MNase的核酸内切酶活性,广泛应用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。 特性与优势 抗体结合能力:Protein G能够特异性结合免疫球蛋白的Fc区,将pG-MNase引导至目标蛋白所在的染色质区域。 高效核酸酶活性:MNase能够高效降解单链和双链DNA,产生3'磷酸末端的单核苷酸和寡核苷酸。 低细胞需求量:适用于低至50个细胞的实验,尤其适合早期胚胎、干细胞和肿瘤等研究领域。 高信噪比:在CUT&RUN技术中,pG-MNase能够高效切割靶蛋白两侧的DNA并释放基因组DNA片段,背景低,重复性好。 应用场景 pG-MNase主要用于CUT&RUN(Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease)技术,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。

UDG可快速水解单链或双链DNA中的尿嘧啶释放游离尿嘧啶但对RNA或短于6个碱基的DNA寡聚体无活性

FnCas12a(又称Cpf1)是一种由crRNA介导的DNA核酸内切酶,来源于弗朗西斯菌(Francisella tularensis)。作为CRISPR基因编辑系统的重要成员,FnCas12a凭借其独特的工作机制和优势,正在成为基因编辑和核酸检测领域的新宠。 工作原理 FnCas12a通过识别靶标DNA上的PAM序列(通常是TTN)来特异性结合并切割双链DNA,产生粘性末端。与Cas9不同,FnCas12a仅需要单个crRNA作为引导,且切割位点远离识别位点,这使得它在基因组编辑中具有更高的灵活性。此外,FnCas12a在完成顺式切割后,会被激活反式剪切活性,能够进一步切割体系中的任意单链DNA,这一特性被广泛应用于高灵敏度的核酸检测。 独特优势 高效编辑:FnCas12a切割后产生粘性末端,更利于基因组的精确编辑。 灵活性高:其切割位点远离识别位点,为连续多次编辑提供了可能性。 靶向范围广:FnCas12a对PAM序列的要求相对宽松,能够识别更多靶点。 检测灵敏度高:其反式剪切活性可用于快速检测靶标核酸,已被应用于HOLMES核酸快检技术。

它不仅提高了实验的准确性和可靠性,还为科研人员提供了便捷的操作体验。

在分子生物学的微观世界中,核糖核酸酶III(dsRNA-specific,RNase III)以其对双链RNA(dsRNA)的高度特异性切割能力,成为基因表达调控和RNA代谢研究中不可或缺的“精准剪刀”。 RNase III是一种内切酶,专门识别并切割双链RNA分子。它在细胞中发挥着重要的生理功能,尤其是在基因沉默和RNA干扰(RNAi)过程中。RNAi是一种通过双链RNA诱导基因沉默的机制,广泛存在于真核生物中。RNase III在这一过程中扮演着关键角色,它能够将长的双链RNA切割成短的干扰RNA(siRNA),这些siRNA随后被整合到RNA诱导沉默复合体(RISC)中,进而特异性地降解与之互补的mRNA,从而实现基因沉默。 在大肠杆菌中,RNase III的活性对于维持细胞内RNA代谢的平衡至关重要。它能够降解由转座子和病毒产生的双链RNA,防止这些有害的RNA结构积累,从而保护细胞的基因组稳定性。此外,RNase III还参与了rRNA的加工和成熟过程,确保核糖体的正常组装和功能。 在实验室研究中,RNase III的特性被广泛利用。

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