后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。
重组人激肽释放酶3(Recombinant Human Kallikrein 3,简称KLK3),又称前列腺特异性抗原(PSA),是丝氨酸蛋白酶家族的重要成员,主要由前列腺上皮细胞分泌。KLK3在精液中含量丰富,能够水解精液凝胶蛋白,促进精液液化,是男性生殖过程中的关键酶。 在临床医学中,KLK3最广为人知的应用是作为前列腺癌的肿瘤标志物。血液中KLK3水平的升高常提示前列腺病变,包括良性前列腺增生、前列腺炎及前列腺癌。因此,重组人KLK3蛋白广泛用于开发诊断试剂盒、校准标准品及质控品,为临床检测提供重要支持。 该重组蛋白通常采用真核表达系统(如HEK293或CHO细胞)制备,确保其天然构象和酶活性。其高纯度和高稳定性使其适用于酶活性分析、抗体筛选、药物开发及基础科研等领域。此外,KLK3还参与细胞外基质降解、肿瘤侵袭和转移等过程,是肿瘤微环境研究的重要靶点。 重组人KLK3蛋白不仅为前列腺癌的早期诊断和治疗监测提供了可靠工具,也为深入理解其在生理和病理过程中的作用机制奠定了基础,具有重要的科研和临床应用价值。
它在细胞生长、分化、存活以及组织修复等多个生理过程中发挥着重要作用。
重组大鼠白细胞介素-21(Recombinant Rat IL-21)是一种重要的免疫调节因子,属于白细胞介素家族。它在调节免疫反应、促进淋巴细胞的增殖和活化以及抗肿瘤免疫中发挥着关键作用,广泛应用于免疫学研究和肿瘤治疗。 结构与特性 重组大鼠IL-21是一种非糖基化的单链多肽,含有154个氨基酸,分子量约为17.5 kDa。它由大肠杆菌表达,纯度高于98%,内毒素水平低于1 EU/μg。这种蛋白的物理外观为无菌过滤的白色冻干粉末。 生物活性与功能 重组大鼠IL-21具有显著的免疫调节活性。它能够促进T细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)的增殖和活化,增强这些细胞的细胞毒性,从而提高机体的抗肿瘤和抗病毒能力。IL-21通过与细胞表面的IL-21受体结合,激活下游信号通路,如JAK-STAT通路,从而促进细胞的增殖和存活。此外,IL-21还能够调节B细胞的分化和抗体的产生,增强体液免疫反应。 应用与研究 重组大鼠IL-21广泛应用于细胞培养、免疫反应研究和肿瘤模型构建。它可以用于研究免疫调节机制、评估抗肿瘤药物的效果,以及探索与免疫相关的疾病模型。
其在基础研究和药物开发中的应用前景广阔,具有重要的科研和临床价值。
磁珠法质粒小量抽提试剂盒是一种基于磁性纳米技术的核酸纯化工具,结合了经典的SDS碱裂解法和磁珠吸附技术,能够从大肠杆菌中快速、高效地提取高质量的质粒DNA。工作原理该试剂盒利用磁珠表面修饰的官能团,在高盐条件下特异性吸附质粒DNA,而杂质如蛋白质、盐离子等则通过洗涤液被去除。当条件改变时,质粒DNA从磁珠表面洗脱下来,从而实现快速分离和纯化。产品特点高效提取:从2 mL过夜培养的菌液(OD600 = 2.0)中可获得超过15 μg的高拷贝质粒DNA。操作简便:无需多次离心,整个提取过程可在1小时内完成,适合高通量操作。纯度高:提取的质粒纯度高,OD260/OD280比值一般为1.8-1.9,OD260/OD230比值大于2.0,可直接用于下游实验。自动化兼容:可与自动化核酸提取仪配合使用,实现完全自动化操作。 应用场景提取的质粒DNA可用于多种下游应用,包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等分子生物学实验。使用方法菌液处理:取适量菌液离心,弃上清后用裂解液悬浮细菌沉淀。裂解与吸附:加入裂解液和中和液,裂解细胞后加入磁珠,吸附质粒DNA。
在实际应用中,RNase T1被广泛用于研究RNA的二级结构和三级结构。
重组人骨保护素(Recombinant Human OPG)是一种重要的分泌性蛋白,属于肿瘤坏死因子受体超家族。它在调节骨代谢和心血管保护中发挥着关键作用,为相关疾病的治疗提供了新的靶点和研究方向。 生物学功能 OPG 主要由成骨细胞、软骨细胞和某些免疫细胞产生。它通过与破骨细胞前体细胞表面的 RANKL 结合,抑制 RANKL 与其受体 RANK 的相互作用,从而抑制破骨细胞的分化和活性,减少骨吸收,维持骨密度。此外,OPG 还在心血管系统中发挥保护作用,能够抑制血管平滑肌细胞的增殖和迁移,减少动脉粥样硬化的发生。 重组蛋白的制备 重组人 OPG 蛋白的制备利用基因工程技术实现,具有高纯度和生物活性。通过在蛋白的 C - 末端添加 His 标签,便于蛋白的纯化和检测。这种重组蛋白为研究人员提供了稳定、可靠的实验材料,可用于多种研究应用,包括体外细胞实验和体内动物模型。 基础研究 在基础研究中,重组 OPG 蛋白可用于深入研究其在骨代谢和心血管保护中的具体机制。
在人体免疫系统中,T细胞是抵御病原体入侵和维持免疫平衡的关键力量。
重组人碳酸酐酶IX(Recombinant Human CA9)是缺氧诱导的跨膜金属酶,分子量约54 kDa,通过HEK293细胞表达系统生产,纯度>95%,保留天然糖基化与酶活性(催化CO₂水合速率常数kcat≈1.2×10⁶ s⁻¹)。作为实体瘤缺氧标志物,CA9通过调节pH稳态促进肿瘤侵袭与免疫逃逸,是诊断与治疗的理想靶点。 结构与功能机制 CA9胞外催化结构域含锌离子结合位点,重组蛋白与天然酶活性一致,可特异性水解碳酸生成H⁺/HCO₃⁻,体外实验显示其使培养基pH值在6小时内降至6.4,模拟肿瘤酸性微环境。 突破性应用 分子影像:⁸⁹Zr标记抗CA9抗体PET成像,在肾透明细胞癌模型中检出3 mm转移灶(敏感性92%); 靶向治疗:CA9抑制剂SLC-0111联合PD-1抑制剂使三阴性乳腺癌小鼠生存期延长40%; CAR-T细胞疗法:靶向CA9的CAR-T细胞在缺氧模型中浸润增加5倍,且通过pH感应开关避免正常组织毒性。 技术优化与展望 需解决重组蛋白锌离子稳定性(建议添加0.1 mM ZnCl₂保护剂)及糖基化异质性。
在正常生理条件下,PKM2 的表达水平较低,但在肿瘤细胞中,PKM2 的表达显著上调。
重组人MARCO蛋白(Recombinant Human MARCO Protein),带有His标签,是一种在免疫学和细胞生物学研究中具有重要价值的蛋白质。MARCO(Macrophage Receptor with Collagenous Structure)是一种清道夫受体,主要表达于巨噬细胞表面,参与病原体识别和清除。His标签的引入,使得该蛋白能够通过金属螯合亲和层析高效纯化,并便于后续的检测和应用。 在功能上,MARCO能够识别多种配体,包括细菌、病毒和细胞碎片等,介导巨噬细胞的吞噬作用,参与机体的天然免疫防御。此外,MARCO还参与调节炎症反应和组织修复,维持组织稳态。研究表明,MARCO在肺部疾病、心血管疾病和感染性疾病中发挥重要作用,其表达水平与疾病的发生和进展密切相关。 重组人MARCO蛋白的制备通常采用真核表达系统,以确保其正确的折叠和翻译后修饰。这种高纯度的重组蛋白可用于体外实验,如受体-配体结合分析、信号通路研究、药物筛选以及抗体开发等。在药物研发领域,MARCO已成为潜在的治疗靶点,针对MARCO的激动剂和拮抗剂正在开发中,有望为相关疾病的治疗提供新的策略。
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