电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
全能核酸酶(Benzonase Nuclease)是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的基因工程核酸内切酶,能够高效降解所有形式的DNA和RNA,包括单链、双链、线状、环状和超螺旋结构。其纯度≥99%,并带有His-tag,便于纯化和检测。 特性与优势 广谱降解能力:全能核酸酶能够将DNA和RNA降解为2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,且不具有碱基识别特异性。 高稳定性:在广泛的条件下(如6M尿素、0.1M盐酸胍、0.4% Triton X100、0.1% SDS、1 mM EDTA、1 mM PMSF等)仍保持高效活性。 无蛋白酶活性:不具有蛋白水解活性,不会对蛋白质样品造成损伤。 His-tag:带有His-tag的全能核酸酶便于通过金属螯合层析进行纯化和检测。 应用场景 去除核酸污染:在生物制药中,全能核酸酶可用于去除疫苗、蛋白或多糖类生物制品中的核酸残留,使核酸含量符合FDA和国内的要求。 降低样品粘度:在细胞裂解后,全能核酸酶能够降解核酸,减少溶液粘度,便于后续操作。 细胞培养产物纯化:降解核酸,避免核酸对细胞产物的影响,提高纯化效率。
在非洲猪瘟病毒(ASFV)检测中,该产品凭借其高灵敏度和防污染特性,能够快速、准确地检测低浓度病毒
λ核酸外切酶(Lambda Exonuclease)是一种来源于λ噬菌体的核酸外切酶,能够特异性地作用于双链DNA,沿5′→3′方向逐步去除5′端的单核苷酸。这种酶在分子生物学实验中具有广泛的应用。 工作原理 λ核酸外切酶的最适底物是5′端磷酸化的双链DNA。它能够高效地从5′端逐步降解双链DNA,生成单链DNA或单核苷酸。该酶对单链DNA和非磷酸化的双链DNA底物的降解效率较低,分别只有磷酸化双链DNA的1%和5%。此外,λ核酸外切酶不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。 应用场景 单链DNA制备:通过降解双链DNA的一条链,λ核酸外切酶可用于制备单链DNA。例如,在PCR产物中,使用5′端磷酸化的引物,可以通过λ核酸外切酶特异性降解其中一条链,从而获得单链DNA。 DNA末端修饰:在某些克隆实验中,λ核酸外切酶可用于去除DNA片段的5′端核苷酸,以实现特定的末端修饰。 基因编辑:在基因编辑技术中,λ核酸外切酶可用于处理线性化质粒,以提高同源重组的效率。 DNA损伤研究:λ核酸外切酶可用于研究DNA损伤和修复机制,通过降解损伤的DNA片段来模拟细胞内的DNA修复过程。
在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段。
等温扩增变色检测试剂盒是一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的核酸检测工具,能够在恒定温度下快速扩增目标DNA,并通过颜色变化直观地判断检测结果。这种技术无需复杂的温度循环设备,操作简便,适合快速检测病原体和微生物污染。 产品特性 高灵敏度:灵敏度比传统PCR方法高2-5个数量级,检测下限可达20-200 copies/μL。 快速检测:仅需1小时即可完成反应,适合快速诊断。 可视化结果:无需电泳,通过颜色变化(如紫罗兰或蓝紫色变为天蓝色或深天蓝色)即可判断结果。 防污染设计:采用dU掺入和热敏型UDG酶技术,有效防止扩增产物污染。 应用场景 该试剂盒广泛应用于检测生物样品中的病原体、微生物污染等。例如,碧云天的BeyoColor™等温扩增变色检测试剂盒可用于检测特定病原体的感染。此外,一些试剂盒还专门用于检测支原体污染,如BeyoColor™支原体等温扩增变色检测试剂盒。 使用方法 配制反应体系:将LAMP Master Mix、引物、模板DNA、Bst DNA Polymerase等组分混合。 反应条件:在61-65℃下孵育30-60分钟。
缓冲液应保存在室温下,避免光照和污染。由于甲酰胺具有一定的挥发性,建议在使用后立即密封保存。
T7 Endonuclease I(T7EI)是一种来源于T7噬菌体的核酸内切酶,能够特异性识别并切割DNA中的错配碱基对、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。这种酶在基因编辑领域,尤其是CRISPR-Cas9技术中,被广泛用于检测基因突变和编辑效率。 功能与特性 错配识别:T7EI能够识别DNA中的不完全配对碱基对,并在错配位点的5'端切割第一、第二或第三个磷酸二酯键。 高特异性:该酶对特定DNA结构具有高度特异性,能够有效区分野生型和突变型DNA。 应用广泛:除了用于基因编辑效果的检测,T7EI还可用于分解四方向交叉DNA、检测或切割异源双链DNA、随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。 在CRISPR基因编辑中的应用 在CRISPR-Cas9基因编辑中,T7EI常用于检测目标基因是否成功引入突变。具体步骤如下: PCR扩增:分别以野生型和突变型DNA为模板,扩增包含突变位点的DNA片段。 变性与退火:将PCR产物变性后退火,形成异源双链DNA。 酶切反应:加入T7EI,在37℃下反应15-30分钟,通过琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果。
试剂盒整合了dUTP/UDG防污染系统,通过在PCR扩增产物中掺入 dUTP,有效避免了假阳性结果
Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。 工作原理 Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤: 复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。 切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。 结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。 应用场景 NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。 单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。 ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。 CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。
由于UDG在高温下仍保留部分活性,建议在反应结束后添加尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)
在分子生物学实验中,PCR技术的准确性和效率是科研人员关注的重点。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)以其卓越的高保真性和便捷性,成为了高精度基因扩增实验的理想选择。 Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为高保真DNA扩增而设计。其核心成分是Phusion DNA聚合酶,这种聚合酶融合了Pfu DNA聚合酶的高保真性和Taq DNA聚合酶的高效合成能力,能够在保证高准确性的前提下快速扩增DNA片段。Phusion酶的保真度比普通Taq酶高出约50倍,甚至比Pfu酶更高,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。此外,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。
上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!