Phusion DNA Polymerase适用于多种PCR应用,包括常规PCR、长片段扩增
Bsu DNA Polymerase (Large Fragment) 是一种经过基因工程改造的酶,来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的DNA聚合酶I。通过删除其5′→3′核酸外切酶结构域,保留了5′→3′聚合酶活性,同时去除了3′→5′和5′→3′核酸外切酶活性。特性与优势 链置换活性:该酶具有强大的链置换能力,能够在等温条件下高效扩增DNA。 高活性:在25℃时仍保留50%的DNA聚合酶活性,是相同温度下Klenow片段(3′→5′ exo-)活力的两倍。温和反应条件:最佳反应温度为37℃,适合在较低温度下进行等温扩增。高纯度:不含DNA内切酶、外切酶和核糖核酸酶,确保反应的特异性和可靠性。应用场景Bsu DNA Polymerase (Large Fragment) 广泛应用于以下领域:重组酶聚合酶扩增(RPA):常用于等温扩增,适合快速、灵敏的病原体检测。DNA合成:可用于cDNA第二条链的合成、随机引物法标记以及单个dA的加尾。链置换反应:在需要置换DNA链的实验中表现出色。
后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。
6×甘油凝胶上样缓冲液 I× 是一种常用的核酸电泳辅助试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,能够帮助核酸样品沉入凝胶加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分 6×甘油凝胶上样缓冲液 I× 的主要成分包括:甘油(Glycerol):含量为60%,用于增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔。溴酚蓝(Bromophenol Blue):含量为0.05%,作为示踪染料,用于观察电泳进程。二甲苯青(Xylene Cyanol FF):部分配方中还含有二甲苯青,用于更广泛的示踪。橙黄 G(Orange G):部分配方中添加橙黄 G,进一步扩展示踪范围。Tris-HCl 缓冲液:10 mM,pH 7.6,用于维持电泳过程中的稳定环境。EDTA:60 mM,用于螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。应用场景该缓冲液主要用于核酸(DNA 和 RNA)的琼脂糖凝胶电泳,适用于多种核酸样品的分析和检测。它能够帮助科研人员更清晰地观察核酸片段的迁移情况,从而准确判断核酸的大小和完整性。
其中,750 bp条带的浓度最高,约为20 ng/μL,其余条带浓度约为10 ng/μL。
溴化乙锭溶液(EB, 10 mg/ml, RNase free)是一种高度灵敏的荧光染色剂,广泛用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA和RNA分子。它经过RNase-free处理,适用于RNA样本的电泳。产品特性成分:10 mg/ml溴化乙锭和去离子水。保存条件:室温避光保存,有效期为2年。用途:用于核酸电泳前后的染色,以及流式细胞仪的样品染色处理。荧光特性:在302 nm紫外光激发下,放射出橙红色信号。检测灵敏度:可检测到少至10 ng的DNA条带。使用方法电泳前染色(胶染法):将100 ml的琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%-2%)放入微波炉中融化。冷却至60℃左右后加入5-10 µl的溴化乙锭溶液(10 mg/ml),轻轻摇匀后倒胶,避免产生气泡。待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫外灯下观察拍照。电泳后染色(泡染法):琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有EB(0.5 µg/ml)的电泳缓冲液或去离子水中。室温下染色15-45分钟(取决于凝胶厚度)。可选脱色处理:用去离子水或1 mM MgSO4溶液室温浸泡10-30分钟,以降低背景荧光。
它能够确保miRNA在电泳过程中保持单链状态,从而获得清晰的电泳条带,便于后续分析。
在分子生物学实验中,PCR技术的准确性和便捷性是科研人员追求的目标。Pfu Master Mix (2×) (With Dye)凭借其高保真性和预混染料的特性,成为了实现这一目标的理想选择。 Pfu Master Mix (2×) (With Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为高保真DNA扩增而设计。它以Pfu DNA聚合酶为核心,这种酶源自耐热菌Pyrococcus furiosus,具有强大的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中纠正错误配对的碱基,从而显著提高扩增的准确性。与传统Taq酶相比,Pfu酶的保真度更高,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 与无染料版本不同,Pfu Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料,这使得实验人员在进行PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。这种预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。
Probe qPCR Mix 可用于定量分析基因表达水平,帮助研究人员研究基因在不同生理条件下的变化
在分子生物学研究和临床检测中,快速、准确地检测RNA序列是许多实验的关键。One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)凭借其独特的优势,成为实现这一目标的理想选择。 该试剂盒采用一步法RT-qPCR技术,将逆转录和定量PCR反应集成在同一管中完成。这种设计不仅简化了操作流程,减少了移液步骤,还有效降低了样本间交叉污染的风险。同时,试剂盒中加入了UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能够降解含有尿嘧啶的PCR产物,从而有效防止因残留产物导致的假阳性结果。 One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)还具备高灵敏度和高特异性的特点。它采用了优化的反应体系,能够高效合成cDNA,并在后续的qPCR中实现精准定量。即使对于低丰度的RNA模板,该试剂盒也能准确识别,特别适合检测微量RNA。此外,其热启动Taq DNA聚合酶和优化的反应条件,进一步提高了扩增效率和特异性。 在实际应用中,One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)广泛适用于检测总RNA、mRNA、RNA病毒等样本。
Taq PCR Master Mix (2×) Without Dye 是一种即用型的PCR预混液
T4 Gene 32 Protein(gp32)是一种单链DNA(ssDNA)结合蛋白,来源于T4噬菌体,广泛应用于分子生物学实验中。它在T4噬菌体的DNA复制、重组和修复过程中发挥关键作用。功能与特性稳定ssDNA:gp32能够特异性结合ssDNA,防止其重新退火或被核酸酶降解,从而保护ssDNA的完整性。促进DNA代谢:通过与ssDNA结合,gp32为多种DNA代谢相关蛋白(如DNA聚合酶、限制性内切酶等)提供结合位点,促进其功能。结构域功能:gp32由三个结构域组成,其中C端结构域在调节ssDNA结合和与其他蛋白的相互作用中起关键作用。应用场景电子显微镜观察:用于稳定和标记ssDNA区域,便于通过电子显微镜观察细胞内DNA的结构。提高RT-PCR效率:在RT-PCR中,gp32能够增加反转录酶的产量和过程性,从而提高反应效率。增强PCR产物产量:在PCR反应中,gp32能够提高产物的产量和特异性,特别是在处理复杂样本(如土壤样本)时,可有效降低抑制物的影响。重组酶聚合酶扩增(RPA):在RPA反应中,gp32能够显著提高扩增效率,适用于快速、等温的核酸检测。
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