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该产品不仅适用于琼脂糖凝胶电泳还可用于非变性丙烯酰胺凝胶电泳,加入PCR产物后不会影响后续的酶切反应

在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。

对肠道病毒RNA进行4倍稀释系列检测,结果显示One Step RT-qPCR能够以更高的灵敏度检测

分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性、纯度和分子量。而5×RNA Loading Buffer则是RNA电泳中不可或缺的重要试剂。 5×RNA Loading Buffer是一种5倍浓缩的上样缓冲液,专为RNA非变性凝胶电泳设计。其主要成分包括甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青FF。甘油的作用是增加样品的密度,使RNA样品能够顺利沉入凝胶加样孔中,避免漂浮。EDTA则用于螯合金属离子,防止RNA降解。溴酚蓝和二甲苯青FF作为示踪染料,能够在电泳过程中指示RNA的迁移位置。 使用时,通常将RNA样品与5×RNA Loading Buffer按4:1的体积比混合,例如4μL的RNA样品加入1μL的上样缓冲液,混匀后即可上样。这种缓冲液经过DEPC处理,确保无RNase污染,从而保护RNA样品的完整性。 5×RNA Loading Buffer适用于多种RNA电泳实验,包括非变性琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂糖凝胶电泳。它不仅操作简便,还能有效防止RNA降解,确保电泳结果的可靠性。

建议使用2.0%-2.5%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。

溴酚蓝蔗糖溶液(0.25%)是一种专为核酸电泳设计的上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由溴酚蓝、二甲苯青FF和蔗糖组成,能够为核酸电泳提供清晰的指示和稳定的环境。产品特性成分:主要由0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF和15%蔗糖组成。指示剂:溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,稀释后比重较大,加样后易下沉,颜色清晰可见,便于观察电泳进程。保存条件:室温避光保存,有效期为3个月。 使用方法稀释:通常按1:5的比例将2×溴酚蓝蔗糖溶液稀释至1×使用。电泳操作:将稀释后的缓冲液与核酸样品混合后直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。溴酚蓝蔗糖溶液(0.25%)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为核酸电泳实验中的理想选择。

在现代分子生物学研究与临床诊断领域,实时荧光定量PCR(qPCR)技术因其高灵敏度、高特异性和快速检

在分子生物学实验中,PCR技术是不可或缺的工具,而Hot-Start Taq DNA Polymerase则是这一技术中的一颗璀璨明珠。它以其独特的机制和卓越的性能,为PCR反应的精准性和特异性提供了强有力的保障。 传统的Taq DNA聚合酶在室温下就具有活性,这意味着在PCR反应开始之前,引物可能会与模板发生非特异性结合,导致背景产物的产生,从而影响实验结果的准确性。而Hot-Start Taq DNA Polymerase通过特殊的化学修饰或物理方法,解决了这一问题。它在室温下处于“关闭”状态,只有在高温下才会被激活,从而有效避免了非特异性扩增的发生。 Hot-Start Taq DNA聚合酶的激活机制通常基于两种方式。一种是通过化学修饰,如在酶的活性位点引入可逆的化学基团,这些基团在高温下被去除,从而恢复酶的活性。另一种是通过物理方法,如将酶与抗体结合,抗体在高温下变性失活,从而释放出具有活性的Taq酶。无论哪种方式,其核心目标都是确保Taq酶在PCR反应的变性阶段才开始发挥作用。

其中,750 bp条带的浓度通常较高(约100 ng/5 µL),便于观察和作为参考。

TAFE凝胶电泳缓冲液(10×)是一种专为核酸电泳设计的高浓度缓冲液,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳实验中。它主要由Tris、乙酸和EDTA组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由200 mM Tris-乙酸和5 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TAFE工作液含有20 mM Tris-乙酸和0.5 mM EDTA,pH值约为8.2。高效分离:适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。缓冲能力强:在长时间电泳中,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TAFE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TAFE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。

在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段。

在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的核心工具,而AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye)凭借其快速高效的特性,成为了现代实验室中不可或缺的高效解决方案。 AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为快速、高效的DNA扩增而设计。其核心成分是一种经过优化的热启动Taq DNA聚合酶,能够在短时间内完成高效的DNA合成。这种酶结合了热启动技术,确保在PCR反应的高温变性步骤中才被激活,从而有效避免非特异性扩增,提高反应的特异性和灵敏度。 该Master Mix的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。同时,预混染料的加入使得实验人员可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液,进一步提高了实验的便捷性。 AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye)的另一个显著特点是其优化的反应条件。

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