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SYBR Green qPCR Mix是一种高性能的qPCR试剂,凭借其高灵敏度,为生物学研究的工具

在分子生物学实验中,PCR技术是不可或缺的工具,而Hot-Start Taq DNA Polymerase则是这一技术中的一颗璀璨明珠。它以其独特的机制和卓越的性能,为PCR反应的精准性和特异性提供了强有力的保障。 传统的Taq DNA聚合酶在室温下就具有活性,这意味着在PCR反应开始之前,引物可能会与模板发生非特异性结合,导致背景产物的产生,从而影响实验结果的准确性。而Hot-Start Taq DNA Polymerase通过特殊的化学修饰或物理方法,解决了这一问题。它在室温下处于“关闭”状态,只有在高温下才会被激活,从而有效避免了非特异性扩增的发生。 Hot-Start Taq DNA聚合酶的激活机制通常基于两种方式。一种是通过化学修饰,如在酶的活性位点引入可逆的化学基团,这些基团在高温下被去除,从而恢复酶的活性。另一种是通过物理方法,如将酶与抗体结合,抗体在高温下变性失活,从而释放出具有活性的Taq酶。无论哪种方式,其核心目标都是确保Taq酶在PCR反应的变性阶段才开始发挥作用。

dCTP(脱氧胞苷三磷酸)是DNA合成中的关键核苷酸之一,广泛应用于多种分子生物学实验

磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒是一种基于磁性纳米技术的核酸纯化工具,广泛应用于PCR产物纯化、DNA片段回收以及核酸提取等领域。它利用磁珠与核酸的特异性结合,通过简单的操作流程实现高效、快速的核酸纯化。工作原理该试剂盒的核心在于磁珠表面的特殊修饰,使其能够与核酸分子特异性结合。在特定的缓冲液条件下,核酸会吸附到磁珠表面,而杂质(如蛋白质、引物、dNTP等)则被洗去。通过磁场分离,纯化的核酸可以从磁珠上洗脱下来,用于后续实验。产品特点高效回收:对于80 bp至50 kb的DNA片段,回收效率可达95%以上。操作简便:无需离心,整个纯化过程仅需20-30分钟。高通量化:可同时处理多个样本,适合高通量实验。兼容性强:适用于多种下游应用,如PCR、酶切、测序等。应用场景磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒广泛应用于以下领域:PCR产物纯化:去除引物、dNTP等杂质,提高PCR产物的纯度。DNA片段回收:从酶切反应液中回收目标DNA片段。高通量测序:纯化后的DNA可用于文库构建和测序。使用方法混合磁珠溶液:将磁珠溶液加入PCR反应液中,混合均匀。

二甲苯青迁移速度较慢,适用于较大片段的示踪;溴酚蓝迁移速度较快,适用于较小片段的示踪。

核酸内切酶VIII(Endonuclease VIII,Endo VIII)是一种具有N-糖基化酶活性和AP-裂解酶活性的DNA损伤修复酶,广泛应用于基因损伤修复研究和相关生物技术领域。 作用原理 核酸内切酶VIII能够识别双链DNA上受损的嘧啶碱基,并在其N-糖基化酶活性作用下切除这些受损碱基,产生一个脱嘌呤(AP)位点。随后,其AP-裂解酶活性会切割AP位点的3'和5'端,产生一个具有3'和5'磷酸的碱基缺口。这种酶能够识别并切除多种受损碱基,包括尿嘧啶、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇等。 产品特性 高纯度:核酸内切酶VIII经过重组表达,纯度高,无核酸外切酶、核酸内切酶以及RNase残留。 热失活:75℃加热10分钟可使酶失活。 反应条件:在10 mM Tris-HCl、75 mM NaCl、1 mM EDTA(pH 8.0 @ 25℃)的缓冲液中,37℃孵育。 应用场景 DNA损伤和修复研究:用于模拟和修复DNA损伤。 单细胞凝胶电泳(彗星试验):用于检测DNA损伤。 NGS建库:在高通量测序建库中修复DNA损伤。 酶法合成DNA:释放DNA链。

6×DNA 在不同浓度的琼脂糖凝胶中,溴酚蓝和二甲苯青的迁移速率稳定,为实验提供可靠的参考

电泳级橙黄G溶液(1%)是一种专为核酸电泳设计的上样液和生物染色剂母液。它主要由1%的甲基橙和去离子水组成,具有良好的稳定性和实用性。产品特性成分:1%甲基橙、去离子水。用途:主要用于核酸电泳的上样液和生物染色。泳动率:在0.5-1.4%的琼脂糖凝胶中,其泳动率相当于50 bp的双链DNA。保存条件:室温避光保存,有效期为12个月。使用方法电泳上样液:将橙黄G溶液与核酸样品混合后直接用于电泳,橙黄G作为示踪剂,可帮助观察样品的迁移情况。生物染色:可用于生物样品的染色,具体使用方法需根据实验需求调整。注意事项毒性:橙黄G溶液有轻微毒性,操作时需谨慎,避免接触皮肤和吸入。保存:建议在室温下避光保存,以延长产品有效期。用途限制:仅供科研使用,不得用于临床诊断。电泳级橙黄G溶液(1%)凭借其高效、稳定的特性,成为核酸电泳实验中的重要工具,广泛应用于分子生物学研究中。

3'-羟基攻击5'-磷酸末端,形成新的磷酸二酯键,从而完成DNA片段的连接。

λ DNA HindIII + EcoRI是一种常用的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII和EcoRI两种限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。产品特性片段组成:λ DNA HindIII + EcoRI Marker由13条双链DNA条带组成,片段大小范围从125 bp到21,226 bp。即用型设计:已预混1×上样缓冲液,可直接用于凝胶电泳。稳定性:室温保存一个月带型无变化,但建议低温保存以防止核酸酶污染。使用方法电泳条件:凝胶浓度:建议使用0.5%-1.0%的琼脂糖凝胶。电泳缓冲液:1×TAE或0.5-1×TBE。电压:6-8 V/cm,电泳时间30-60分钟。热处理:使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。上样量:根据加样孔宽度,取2-5 µL加入凝胶加样孔中。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。

该试剂盒还采用了dUTP替代dTTP的技术,进一步提高了反应的特异性,减少了非特异性扩增的可能性。

PBCV-1 DNA连接酶(也称为SplintR连接酶或Chorella病毒DNA连接酶)是一种ATP依赖的DNA连接酶,能够高效催化与互补RNA单链配对的两条相邻DNA单链的连接反应。这种酶在连接过程中需要一条互补的RNA链作为“夹板”或“支架”,以固定两条DNA单链,从而实现高效的连接。 工作原理 PBCV-1 DNA连接酶的连接反应依赖于ATP作为能量来源,并且对RNA“夹板”固定的DNA底物具有极高的亲和力(表观Km值为1 nM),这使得它能够在复杂混合物中检测到亚纳摩尔级别的特定RNA。该酶对连接点处的碱基对组合具有一定的耐受性,但某些碱基对组合(如dCG/R或dG/C)可能会抑制酶活性。 应用优势 PBCV-1 DNA连接酶的连接活性远优于传统的T4 DNA连接酶,尤其在高灵敏度RNA检测方面表现出色。它被广泛应用于以下领域: 高灵敏度RNA检测:可用于检测miRNA、mRNA和非编码RNA的定性或定量分析,以及单核苷酸多态性(SNP)和可变剪接的检测。 原位测序:通过连接挂锁探针形成环状模板,用于原位滚环扩增(RCA),从而实现高通量检测。

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