λ DNA/HindIII酶切产物是琼脂糖凝胶电泳中常用的分子量标准用于快速准确地估算DNA片段大小
在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的分析技术,用于分离和检测DNA片段。而10×DNA Loading Buffer则是这一实验中不可或缺的重要试剂。它是一种10倍浓缩的上样缓冲液,专门用于DNA凝胶电泳,能够帮助DNA样品顺利沉入凝胶加样孔中,并在电泳过程中提供清晰的指示。 10×DNA Loading Buffer的主要成分包括甘油、溴酚蓝、二甲苯青FF和SDS。甘油的作用是增加样品的密度,确保DNA样品能够沉入凝胶孔中,防止样品漂浮。溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。在1%琼脂糖凝胶中,二甲苯青FF的迁移速率与4000个碱基对的DNA片段大致相同,而溴酚蓝的迁移速率则与约500个碱基对的DNA片段相同。 使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合。例如,对于9μL的DNA样品,加入1μL的10×DNA Loading Buffer,混匀后即可上样。这种缓冲液适用于多种类型的DNA样品,包括PCR产物、质粒DNA和基因组DNA等。
使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合
ris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE)是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别适用于琼脂糖凝胶电泳。它由Tris、磷酸和EDTA组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由900 mM Tris-磷酸和20 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TPE工作液含有90 mM Tris-磷酸和2 mM EDTA,pH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TPE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TPE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。
它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。
Bst DNA Polymerase, Large Fragment 是一种来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)的重组酶,具有5′→3′ DNA聚合酶活性和强大的链置换能力,但缺乏5′→3′核酸外切酶活性。这种酶在等温扩增技术中表现出色,广泛应用于环介导等温扩增(LAMP)、滚环扩增(RCA)、全基因组扩增(WGA)等场景。产品特性 链置换能力:具有强大的链置换活性,能够在等温条件下高效扩增DNA。高灵敏度:能够在低浓度模板下实现高效的DNA扩增。温和反应条件:最佳反应温度为65℃,可在50-68℃的温度范围内稳定工作。高耐盐性:在高盐环境中表现出良好的活性,适合处理复杂的生物样本。无核酸酶残留:无DNA内切酶和外切酶活性,确保反应的特异性和可靠性。应用场景环介导等温扩增(LAMP):用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。滚环扩增(RCA):用于DNA的高效率扩增。全基因组扩增(WGA):用于微量DNA模板的快速扩增。高GC含量DNA测序:适用于高GC含量的DNA模板的测序。
6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,SYBR Green染料因其高灵敏度和广泛的适用性而被广泛使用。然而,某些qPCR仪器(如某些型号的ABI仪器)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了SYBR Green的高效性和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。 低浓度ROX的必要性 在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。然而,并非所有qPCR仪器都需要高浓度的ROX。某些仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为了满足这些仪器的需求而设计的。 产品特点 优化的反应体系:SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及低浓度的ROX参考染料。
上样与电泳:混合均匀后,将样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。
甲醛凝胶加样缓冲液(10×, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的10倍浓缩上样缓冲液,经过RNase-free处理,能够有效避免RNA降解,确保电泳结果的可靠性。产品特性成分:主要由溴酚蓝、二甲苯青FF、甘油、EDTA和DEPC处理水组成。用途:专用于RNA甲醛变性凝胶电泳,稀释至1×后比重较大,加样后易下沉,颜色清晰可见,便于电泳指示。保存条件:室温避光保存,有效期为12个月。使用方法稀释:按照每9μL RNA样品加入1μL甲醛凝胶加样缓冲液(10×, RNase free)的比例混合。电泳操作:将混合后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项避免RNase污染:实验过程中需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。甲醛凝胶加样缓冲液(10×, RNase free)凭借其高效、稳定和无RNase污染的特性,成为RNA电泳实验中的理想选择。
GoldenView 吖啶橙核酸染料与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当。
在现代分子生物学实验室中,Taq PCR Master Mix(2×)是一种极为重要的实验试剂,它为聚合酶链式反应(PCR)的高效进行提供了强大的支持。这种预混液以其便捷性和高效性,成为了众多科研人员和实验工作者的首选。 Taq PCR Master Mix(2×)是一种预先配制好的PCR反应体系,其浓度为常规反应所需浓度的两倍。它包含了Taq DNA聚合酶、dNTPs(脱氧核苷三磷酸)、反应缓冲液以及其他必要的成分,但不包含染料。这种设计使得实验人员在进行PCR反应时,只需将模板DNA、引物和水加入到预混液中,即可快速配制好反应体系,大大简化了实验操作步骤,节省了时间和精力。 Taq PCR Master Mix(2×)的高效性主要体现在以下几个方面。首先,它所含的Taq DNA聚合酶具有出色的耐热性和高效的DNA合成能力,能够在短时间内完成目标DNA片段的扩增。其次,预混液中的反应缓冲液经过优化,能够为Taq酶提供最佳的反应环境,确保反应的高效进行。此外,dNTPs的浓度也经过精确调整,能够满足PCR反应的需求,同时避免因过量而导致的副反应。
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