RcView 吖啶橙核酸染料是一种细胞可渗透的荧光染料,能够与核酸结合并发出强烈的荧光信号。
蛋白G-微球菌核酸酶(Protein G-MNase,简称pG-MNase)是Protein G与微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease,MNase)的融合表达产物。它兼具Protein G的抗体结合活性和MNase的核酸内切酶活性,广泛应用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。 特性与优势 抗体结合能力:Protein G能够特异性结合免疫球蛋白的Fc区,将pG-MNase引导至目标蛋白所在的染色质区域。 高效核酸酶活性:MNase能够高效降解单链和双链DNA,产生3'磷酸末端的单核苷酸和寡核苷酸。 低细胞需求量:适用于低至50个细胞的实验,尤其适合早期胚胎、干细胞和肿瘤等研究领域。 高信噪比:在CUT&RUN技术中,pG-MNase能够高效切割靶蛋白两侧的DNA并释放基因组DNA片段,背景低,重复性好。 应用场景 pG-MNase主要用于CUT&RUN(Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease)技术,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。
在多组分检测中,ROX染料的稳定信号为其他荧光信号提供了稳定的基线有助于更准确地分析多重qPCR反应
在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的核心手段,而Hot-Start Taq Master Mix (2×)(无染料)则是这一技术的升级版,为实验人员提供了一个高效、精准且便捷的PCR反应体系。 Hot-Start Taq Master Mix (2×)是一种预配制的双倍浓度PCR反应混合液,专为提高PCR反应的特异性和灵敏度而设计。它结合了Hot-Start技术与Taq DNA聚合酶的优势,同时省略了染料成分,为后续的实验操作提供了更大的灵活性。 Hot-Start技术是该Master Mix的核心亮点。传统Taq酶在室温下即可表现出活性,容易导致引物的非特异性结合和扩增产物的背景噪声。而Hot-Start Taq Master Mix通过化学修饰或抗体结合的方式,使Taq酶在室温下处于“关闭”状态,只有在高温变性步骤(通常在95℃)时才会被激活。这种机制有效避免了非特异性扩增,尤其适用于复杂模板或低丰度目标基因的扩增。
由于UDG在高温下仍保留部分活性,建议在反应结束后添加尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)
在分子生物学实验中,6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是一种常用的试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,帮助核酸样品沉入凝胶加样孔并提供电泳迁移的示踪功能。 组成成分及作用6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 的主要成分包括:二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚蓝(Bromophenol Blue):这两种染料在电泳过程中作为示踪剂,帮助观察电泳的进程。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔中。Tris-HCl 和 EDTA:Tris-HCl 提供稳定的缓冲环境,而 EDTA 可以螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法混合比例:通常将 1 μL 的 6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 与 5 μL 的核酸样品混合。电泳操作:混合后的样品可以直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中,通过观察染料的迁移情况来判断电泳是否完成。特点与优势双色示踪:二甲苯青和溴酚蓝的迁移速度不同,分别对应不同大小的 DNA 片段,可提供更准确的电泳进程指示。
Plant Direct PCR Master Mix (2×) 是一种专为植物样本设计的预混液
4S Green 核酸染色剂是一种无毒、无致癌作用的核酸荧光染料,可替代传统的溴化乙锭(EB)用于核酸染色。它具有与 EB 相当的灵敏度,能够检测到低浓度的核酸分子,同时避免了 EB 的高毒性和潜在致癌性。产品特点安全性高:4S Green 是一种油性大分子染料,无法穿透细胞膜,诱变性远低于 EB。灵敏度高:能够检测到低浓度的核酸,适用于各种大小片段的电泳染色。稳定性强:在室温下稳定,耐光性强,可在酸性或碱性缓冲液中长时间保存。操作简便:适用于预制胶染色和电泳后染色,无需脱色或冲洗。应用范围4S Green 核酸染色剂广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中的双链 DNA、单链 DNA 和 RNA 的检测。它还可用于凝胶染色、连接、转化、染色后凝胶提取和转染。使用方法预制胶染色:将 4S Green 加入冷却至 50-60℃的琼脂糖溶液中,使其终浓度为 1×,轻轻混合后倒胶。电泳后染色:将 4S Green 10000× 储液稀释至 3× 染色液,将凝胶浸泡其中,室温振荡染色 30 分钟。
将 4S Green 10000× 储液稀释至 3× 染色液,将凝胶浸泡其中,室温振荡染色 30 分
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。
缓冲液应保存在室温下,避免光照和污染。由于甲酰胺具有一定的挥发性,建议在使用后立即密封保存。
λ核酸外切酶(Lambda Exonuclease)是一种来源于λ噬菌体的核酸外切酶,能够特异性地作用于双链DNA,沿5′→3′方向逐步去除5′端的单核苷酸。这种酶在分子生物学实验中具有广泛的应用。 工作原理 λ核酸外切酶的最适底物是5′端磷酸化的双链DNA。它能够高效地从5′端逐步降解双链DNA,生成单链DNA或单核苷酸。该酶对单链DNA和非磷酸化的双链DNA底物的降解效率较低,分别只有磷酸化双链DNA的1%和5%。此外,λ核酸外切酶不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。 应用场景 单链DNA制备:通过降解双链DNA的一条链,λ核酸外切酶可用于制备单链DNA。例如,在PCR产物中,使用5′端磷酸化的引物,可以通过λ核酸外切酶特异性降解其中一条链,从而获得单链DNA。 DNA末端修饰:在某些克隆实验中,λ核酸外切酶可用于去除DNA片段的5′端核苷酸,以实现特定的末端修饰。 基因编辑:在基因编辑技术中,λ核酸外切酶可用于处理线性化质粒,以提高同源重组的效率。 DNA损伤研究:λ核酸外切酶可用于研究DNA损伤和修复机制,通过降解损伤的DNA片段来模拟细胞内的DNA修复过程。
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