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此外,它还被用于DNA末端修饰,如将黏性末端转换为平末端,或在3'末端添加特定核苷酸。

两步法sgRNA合成试剂盒是一种基于PCR扩增和T7 RNA聚合酶体外转录的工具,专门用于CRISPR/Cas9基因编辑中sgRNA(单导向RNA)的合成。这种试剂盒通过两步反应实现sgRNA的高效合成,具有高产量、高纯度和高活性的特点。 工作原理 两步法sgRNA合成试剂盒的工作原理分为两个主要步骤: 模板制备:通过PCR扩增生成包含T7启动子序列和目标sgRNA序列的双链DNA模板。试剂盒提供预混的模板混合物(Template Mix),用户只需设计并合成目标特异性DNA寡核苷酸(oligo)作为上游引物。 体外转录:利用T7 RNA聚合酶在体外转录生成sgRNA。转录完成后,通过DNase I消化去除DNA模板,纯化后的sgRNA可用于后续的基因编辑实验。 优势 高产量:单次反应可在0.5-4小时内获得10-40μg的sgRNA,满足大多数基因编辑实验的需求。 高纯度:合成的sgRNA经过纯化,纯度高,条带单一,可有效减少脱靶效应。 操作简便:试剂盒提供所有必要的试剂和详细的说明书,用户只需按照步骤操作即可完成sgRNA的合成。

这一特性使其在治疗炎症性骨疾病(如类风湿性关节炎)中也具有潜在的应用价值。

生长激素(GH,Growth Hormone),也称为人体生长素,是一种由脑下垂体前叶分泌的肽类激素。它在人体的生长发育、新陈代谢和免疫调节中发挥着至关重要的作用。GH的发现和研究,不仅为理解人体生长机制提供了重要线索,也为治疗生长相关疾病带来了希望。 生长激素的功能 GH的主要功能是促进身体的生长和发育。它通过刺激肝脏和其他组织产生胰岛素样生长因子-1(IGF-1),间接促进骨骼、肌肉和内脏器官的生长。GH还能直接作用于脂肪细胞,促进脂肪分解,增加能量供应。此外,GH在调节蛋白质合成和碳水化合物代谢方面也起着重要作用,有助于维持身体的正常生理功能。 GH分泌的调控 GH的分泌受到多种因素的调控,包括下丘脑释放的生长激素释放激素(GHRH)和生长抑素(SS)。GHRH刺激GH的分泌,而生长抑素则抑制其分泌。此外,睡眠、运动、应激和营养状态等也会影响GH的分泌。例如,深度睡眠和剧烈运动可以显著增加GH的分泌,而长期饥饿或营养不良则会导致GH分泌减少。

干扰素(IFN)是一类具有广泛生物活性的蛋白质,其中IFN-α2b是干扰素α家族的重要成员。

在现代生物医学领域,重组人生长激素(GH, Human)的生产技术取得了显著进展,其中利用中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)表达的重组人生长激素(GH, Human (CHO-expressed))尤为引人注目。这种重组蛋白不仅具有与天然生长激素相同的生物活性,还为治疗生长激素缺乏症等相关疾病提供了高效、安全的治疗选择。 CHO细胞与重组蛋白表达 CHO细胞是一种常用的哺乳动物细胞系,因其稳定的生长特性和高效的蛋白表达能力而被广泛应用于重组蛋白的生产。通过基因工程技术,科学家们将人生长激素基因导入CHO细胞中,使其能够高效表达重组人生长激素。这种重组蛋白在结构和功能上与天然生长激素几乎完全相同,能够有效刺激骨骼、肌肉和内脏器官的生长。 重组人生长激素的应用 重组人生长激素(GH, Human (CHO-expressed))主要用于治疗生长激素缺乏症(GHD),这是一种常见的内分泌疾病,尤其在儿童中较为常见。GHD患者通常表现为生长迟缓、身材矮小,甚至可能伴有代谢异常。重组人生长激素的使用可以显著改善这些症状,促进患者的正常生长发育。

CGRP 作为一种重要的生物活性肽,在疼痛感知和血管调节中发挥着关键作用。

白细胞介素-4(IL-4)是一种重要的细胞因子,在调节免疫反应中发挥着关键作用。通过在大鼠中研究IL-4,科学家们能够更好地理解其在免疫系统中的功能,并为人类相关疾病的研究提供重要参考。重组大鼠IL-4(带有组氨酸标签,His)的开发,为研究IL-4的生物学功能提供了有力的工具。 IL-4的生物学功能 IL-4主要由活化的T细胞和肥大细胞产生,对免疫系统的多种细胞具有广泛的影响。它在调节体液免疫和细胞免疫平衡中起着至关重要的作用: 促进Th2细胞分化:IL-4能够促进辅助性T细胞(Th0)向Th2细胞分化,抑制Th1细胞的发育。Th2细胞主要参与体液免疫反应,通过分泌细胞因子如IL-4、IL-5和IL-13,促进B细胞的增殖、分化和抗体的产生。 增强B细胞功能:IL-4能够直接作用于B细胞,促进其增殖和分化,增强B细胞的抗体产生能力。此外,IL-4还能诱导B细胞产生IgG1和IgE抗体,这对于过敏反应和寄生虫感染的免疫反应尤为重要。 调节巨噬细胞功能:IL-4能够抑制巨噬细胞的活性,减少其产生促炎细胞因子(如IL-1、IL-6和TNF-α),从而减轻炎症反应。

它不仅能够吸引中性粒细胞到达感染部位,还能通过激活这些细胞,增强其吞噬和杀菌能力。

PBCV-1 DNA连接酶(也称为SplintR连接酶或Chorella病毒DNA连接酶)是一种ATP依赖的DNA连接酶,能够高效催化与互补RNA单链配对的两条相邻DNA单链的连接反应。这种酶在连接过程中需要一条互补的RNA链作为“夹板”或“支架”,以固定两条DNA单链,从而实现高效的连接。 工作原理 PBCV-1 DNA连接酶的连接反应依赖于ATP作为能量来源,并且对RNA“夹板”固定的DNA底物具有极高的亲和力(表观Km值为1 nM),这使得它能够在复杂混合物中检测到亚纳摩尔级别的特定RNA。该酶对连接点处的碱基对组合具有一定的耐受性,但某些碱基对组合(如dCG/R或dG/C)可能会抑制酶活性。 应用优势 PBCV-1 DNA连接酶的连接活性远优于传统的T4 DNA连接酶,尤其在高灵敏度RNA检测方面表现出色。它被广泛应用于以下领域: 高灵敏度RNA检测:可用于检测miRNA、mRNA和非编码RNA的定性或定量分析,以及单核苷酸多态性(SNP)和可变剪接的检测。 原位测序:通过连接挂锁探针形成环状模板,用于原位滚环扩增(RCA),从而实现高通量检测。

在胚胎发育期间,IGF-BP-2 参与调控细胞的增殖和分化,确保器官和组织的正常形成。

SDF-1β(Stromal Cell-Derived Factor-1β),即基质细胞衍生因子-1β,是一种重要的CXC趋化因子,通过CXCR4受体发出信号。SDF-1β与SDF-1α是选择性基因剪接产生的两种异构体,它们在多种生理和病理过程中发挥重要作用。 一、SDF-1β的结构与功能 SDF-1β由93个氨基酸组成,其C末端比SDF-1α多出4个氨基酸。SDF-1β对B细胞和T细胞具有趋化活性,能吸引这些细胞向特定部位迁移。此外,SDF-1β在血管生成中也起着关键作用,它对血液中蛋白水解作用具有更强的抵抗力,使其在高度血管化的器官中发挥重要作用。 二、SDF-1β在细胞迁移中的作用 SDF-1β通过与CXCR4受体结合,调节多种细胞的迁移和归巢。在骨髓中,它吸引造血干细胞和祖细胞,促进其归巢和分化。在组织损伤时,SDF-1β引导内皮细胞和干细胞向损伤部位迁移,促进血管新生和组织修复。 三、SDF-1β在疾病中的作用 SDF-1β在多种疾病中发挥重要作用。在骨关节炎中,滑液中SDF-1β水平升高,激活软骨细胞中的信号通路,导致细胞外基质降解和炎症因子释放。

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