虽然连接效率较低，但T4 DNA连接酶也可以用于平末端DNA片段的连接。

在分子生物学和生物医学研究中，荧光定量PCR（qPCR）是一种广泛使用的高灵敏度和高特异性的基因表达分析技术。SYBR Green qPCR Mix (2×)作为一种专为qPCR设计的预混液，凭借其高效、便捷和高灵敏度的特点，成为了许多实验室的首选试剂。 SYBR Green qPCR Mix的核心优势 SYBR Green qPCR Mix (2×)是一种预配制的高浓度反应体系，专为qPCR实验设计。它含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、SYBR Green荧光染料以及热启动Taq DNA聚合酶。SYBR Green是一种能够特异性结合双链DNA的小分子荧光染料，在qPCR过程中，随着DNA扩增产物的增加，SYBR Green发出的荧光信号也随之增强。通过实时监测荧光信号的变化，可以实现对目标基因的定量分析。 高灵敏度与特异性 SYBR Green qPCR Mix (2×)具有极高的灵敏度，能够检测到低丰度的基因表达。其优化的反应体系确保了高效的DNA扩增，即使在复杂的样本中也能获得准确的定量结果。

通过基因工程和蛋白质工程技术，科学家们已经开发出多种耐热核糖核酸酶H的变体，进一步优化了其性能。

一步法sgRNA合成试剂盒是一种基于体外转录技术的工具，专门用于快速、高效地合成CRISPR/Cas9系统所需的单导向RNA（sgRNA）。sgRNA是CRISPR基因编辑中的关键组分，它通过引导Cas9核酸酶到达特定的基因组位点，实现精准的DNA切割。 工作原理 该试剂盒利用T7 RNA聚合酶进行体外转录，通过合成的单链DNA模板（oligo）直接生成sgRNA。这种方法操作简单、快速，适合高通量实验。用户仅需设计并合成一条含有特定靶标序列的oligo，试剂盒提供的其他组分（如T7 RNA聚合酶、NTP混合物等）可完成sgRNA的合成。 优势 高产量：单次反应可在4小时内生成50-80μg的sgRNA，满足基因编辑的需求。 高纯度：合成的sgRNA纯度高，条带单一，可有效减少脱靶效应。 高效性：合成的sgRNA能够高效引导Cas9蛋白在特定位点切割DNA，确保基因编辑的高效率。 操作简便：仅需一步反应即可完成sgRNA的合成，适合快速实验。 应用 一步法sgRNA合成试剂盒广泛应用于基因编辑研究，包括基础生物学研究、疾病模型构建和基因治疗等。

SYBR Green I的诱变性明显低于EB，但仍需谨慎操作，避免直接接触皮肤。

在分子生物学和生物技术领域，末端脱氧核糖核酸转移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase，TdT）是一种极为重要的工具酶，以其独特的功能在DNA末端修饰和标记中发挥着关键作用。特别是高浓度的TdT（20U/μl），因其高效的活性和精准的修饰能力，成为实验室中不可或缺的“精准工匠”。 高浓度TdT的特性 末端脱氧核糖核酸转移酶（TdT）是一种依赖于DNA末端的酶，能够将脱氧核苷酸（dNTPs）添加到DNA链的3'末端。与大多数DNA聚合酶不同，TdT不需要模板来指导核苷酸的添加，这使得它能够在DNA末端添加任意序列的核苷酸。高浓度的TdT（20U/μl）具有更高的活性，能够在较短的时间内完成高效的末端修饰。 广泛的应用 高浓度TdT在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如，在DNA末端标记中，TdT被用于添加放射性或荧光标记的核苷酸，从而生成用于杂交实验的标记探针。在DNA测序中，TdT可以用于添加特定的核苷酸序列，帮助确定DNA的末端结构。此外，TdT还被用于DNA片段的连接和修复，通过在DNA末端添加特定的核苷酸序列，促进DNA片段之间的连接。

使用10×DNA Loading Buffer时，通常按照1:9（上样缓冲液：DNA样品）的比例混合

Bst DNA Polymerase, Large Fragment 是一种来源于嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus stearothermophilus）的重组酶，具有5′→3′ DNA聚合酶活性和强大的链置换能力，但不具有5′→3′核酸外切酶活性。这种酶在等温扩增技术中表现出色，尤其适用于环介导等温扩增（LAMP）和滚环扩增（RCA）等应用。功能与特性链置换能力：Bst DNA Polymerase, Large Fragment 具有强大的链置换能力，能够在等温条件下高效扩增DNA。高耐盐性：该酶在高盐环境中表现出良好的活性，适合处理复杂的生物样本。 高灵敏度：能够在低浓度模板下实现高效的DNA扩增。热稳定性：最佳活性温度为65℃，可在60-70℃的温度范围内稳定工作。应用场景环介导等温扩增（LAMP）：用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。滚环扩增（RCA）：用于DNA的高效率扩增。高GC含量DNA测序：适用于高GC含量的DNA模板的测序。全基因组扩增（WGA）：用于微量DNA模板的快速扩增。

在分子生物学研究中，RNase R也具有重要的应用价值。

碱性凝胶加样缓冲液(6×)是一种6倍浓缩的DNA上样缓冲液，专为碱性琼脂糖凝胶电泳设计。它以溴酚蓝和二甲苯青FF为指示剂，稀释至1×后比重较大，加样后易下沉，颜色清晰可见，便于电泳指示。产品特性主要成分：溴甲酚绿、二甲苯青FF、Ficoll 400、NaOH和EDTA。保存条件：室温避光保存，有效期为12个月。用途：主要用于碱性琼脂糖凝胶电泳。使用方法稀释：将6×碱性凝胶加样缓冲液与DNA样品按1:5的比例混合，稀释至1×使用。电泳操作：将混合后的样品加入凝胶加样孔中，进行电泳。注意事项分装使用：如果每次使用量较小，建议分装后使用，避免反复冻融。 避免污染：操作时需佩戴实验服和一次性手套，以确保安全。开封后尽快使用：试剂开封后应尽快使用，以防影响后续实验效果。碱性凝胶加样缓冲液(6×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性，成为碱性琼脂糖凝胶电泳实验中的理想选择。

上样与电泳：混合均匀后，将样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中，进行电泳。

T4 Gene 32 Protein（T4 gp32）是一种由T4噬菌体基因32编码的单链DNA（ssDNA）结合蛋白，广泛应用于分子生物学实验中。该蛋白在T4噬菌体的DNA复制和修复过程中起关键作用，能够协调性地结合并稳定瞬时形成的ssDNA区域。 功能与特性稳定ssDNA：T4 gp32能够高效结合ssDNA，防止其降解或重新退火，尤其在DNA复制和修复过程中发挥重要作用。促进酶活性：该蛋白可显著提高限制性内切酶的消化效率、RT-PCR中反转录的效率，以及T4 DNA聚合酶的活性。增强PCR效率：在PCR反应中，T4 gp32能够提高产物的产量和特异性，特别是在处理复杂样本（如土壤样本）时，可有效降低抑制物的影响。应用场景电子显微镜观察：用于稳定和标记ssDNA区域，便于通过电子显微镜观察细胞内DNA的结构。重组酶聚合酶扩增（RPA）：在RPA反应中，T4 gp32能够显著提高扩增效率，适用于快速、等温的核酸检测。RT-PCR和qPCR：通过结合ssDNA，T4 gp32能够提高反转录效率，增强反应的灵敏度。

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