预混液中加入UDG和dUTP，通过降解含尿嘧啶的DNA片段，防止PCR产物的交叉污染

在分子生物学和生物技术领域，T4多聚核苷酸激酶（T4 Polynucleotide Kinase，T4 PNK）是一种极为重要的工具酶，以其多功能性和高效性在核酸修饰和标记中发挥着关键作用。T4 PNK能够对DNA和RNA的5'末端进行磷酸化修饰，同时也能去除3'末端的磷酸基团，使其成为核酸研究中的“全能工匠”。 T4多聚核苷酸激酶的特性 T4多聚核苷酸激酶是一种多功能酶，具有两种主要活性：5'末端的磷酸化和3'末端的去磷酸化。5'末端的磷酸化活性使其能够将ATP上的γ-磷酸基团转移到DNA或RNA的5'末端，生成5'-磷酸末端。3'末端的去磷酸化活性则能够去除DNA或RNA末端的3'-磷酸基团，生成3'-羟基末端。这种双重活性使得T4 PNK在核酸修饰中具有广泛的应用。 广泛的应用 T4多聚核苷酸激酶在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如，在DNA克隆实验中，T4 PNK被用于磷酸化DNA片段的5'末端，使其能够与载体进行连接。在RNA研究中，T4 PNK可以用于标记RNA的5'末端，生成用于杂交实验的标记探针。

在基因克隆和重组DNA技术中，DNA Marker II 可用于鉴定质粒酶切产物的大小，验证基因片段

T4 RNA连接酶2截短型（突变型）是一种经过基因工程改造的酶，通过引入R55K和K227Q双点突变，显著降低了非特异性连接背景，同时保持了高效的连接活性。这种酶能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'末端，无需ATP参与反应。 特点 高效连接：突变型酶在保持高效连接活性的同时，减少了RNA串联或自连成环等非特异性连接问题。 无需ATP：连接反应不依赖ATP，降低了背景连接。 高纯度：经过严格测试，确保无核酸外切酶、切口酶或RNase残留。 稳定性高：在-20℃条件下可保存3年，避免反复冻融。 应用 T4 RNA连接酶2截短型（突变型）广泛应用于以下领域： 小RNA文库构建：用于二代测序（NGS）中的miRNA、siRNA和piRNA文库构建。 cDNA文库构建：将单链腺苷化引物连接至小RNA上。 链特异性cDNA文库构建：用于合成链特异性的cDNA文库。 使用方法 反应条件：在1×反应缓冲液中，25℃温育。 灭活条件：65℃加热20分钟。 反应体系：通常需要加入PEG 8000以提高连接效率。

耐热核糖核酸酶H是一种能够特异性识别并切割DNA-RNA杂交体中RNA链的酶。

10 mg/ml的溴化乙锭（Ethidium Bromide，EB）溶液是一种常用的核酸染料，广泛应用于分子生物学实验中，尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子，能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA（dsDNA）结合时，荧光强度会增强约25倍，与双链RNA（dsRNA）结合时，荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下（如10 µg/ml）染色后无需脱色处理，即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时，通常有两种染色方法： 电泳前染色：在制胶时加入EB，使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如，每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液，混匀后倒胶。 电泳后染色：将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中，染色15-45分钟。 需要注意的是，EB具有较强的诱变性和毒性，操作时应佩戴手套和实验服，避免直接接触皮肤。此外，EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃，以避免环境污染。

更值得一提的是，该试剂中加入了UDG（尿嘧啶DNA糖基化酶）成分。

在分子生物学和生物技术领域，T4 DNA聚合酶是一种极为重要的工具酶，以其高效性和多功能性在DNA合成、修复和克隆等实验中发挥着关键作用。这种酶来源于T4噬菌体，广泛应用于各种DNA操作中，为科学家们提供了强大的支持。 T4 DNA聚合酶的特性 T4 DNA聚合酶是一种多功能酶，具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性。5'→3'聚合酶活性使其能够以单链DNA为模板，合成互补的DNA链，从而实现DNA的修复和合成。3'→5'外切酶活性则用于校正错误的核苷酸，确保DNA合成的准确性。这种酶的高效性和准确性使其在DNA操作中表现出色。 广泛的应用 T4 DNA聚合酶在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如，在DNA克隆实验中，它被用于填补DNA片段的凹端，制备平末端，从而提高DNA片段与载体的连接效率。在DNA测序中，T4 DNA聚合酶能够合成标记的DNA片段，用于后续的序列分析。此外，它还被用于DNA探针的合成，通过在DNA末端添加标记核苷酸，制备用于杂交实验的探针。

电泳结束后，使用溴化乙锭（EB）或其他DNA染料染色，在紫外灯下观察条带。

CTP（胞苷三磷酸）是一种重要的核苷酸，广泛应用于分子生物学和生物化学实验中。100 mM CTP溶液（无核酸酶）是一种高纯度、无污染的试剂，适用于多种实验需求。 产品特点 高纯度：纯度≥99%，经过HPLC验证。 无核酸酶污染：经测试不含DNase、RNase、磷酸酶和蛋白酶，确保RNA和DNA的完整性。 稳定性高：在pH 7.3-7.5的条件下，CTP溶液极为稳定，可在-20℃保存长达2年。 用途广泛：适用于体外转录、RNA合成与扩增、siRNA合成等。 应用场景 体外转录：用于SP6、T3和T7 RNA聚合酶的反应，生成高质量的RNA。 RNA合成与扩增：提供能量支持，确保反应顺利进行。 siRNA合成：用于合成小干扰RNA，用于基因沉默。 使用注意事项 避免反复冻融：反复冻融会降低CTP的效率。 低温操作：使用时需在冰上操作，并在使用后立即放回-20℃保存。 防止污染：实验过程中需戴一次性手套，避免RNase污染。 100 mM CTP溶液（无核酸酶）凭借其高纯度、无污染和稳定性，已成为分子生物学实验中的重要试剂，特别适合需要高纯度和高效率的实验。

溴酚蓝和二甲苯青FF作为示踪染料，能够在电泳过程中指示RNA的迁移位置。

在分子生物学和生物化学研究中，磷酸酶是一类重要的酶，用于去除核酸和蛋白质末端的磷酸基团。热敏磷酸酶（Thermolabile Phosphatase）作为一种特殊的磷酸酶，因其独特的热敏感性而备受关注。它在实验中提供了精准的去磷酸化控制，成为实验室中不可或缺的工具。 热敏磷酸酶的特性 热敏磷酸酶的主要特点是其在高温下迅速失活。这种特性使得它在实验中可以被精确地控制，避免了过度去磷酸化的问题。在反应过程中，热敏磷酸酶能够在适中的温度下高效地去除磷酸基团，而在需要终止反应时，通过简单的加热步骤即可使其失活。这种精准的调控能力使其在多种实验中表现出色。 广泛的应用 热敏磷酸酶在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如，在DNA克隆实验中，它被用于去除DNA片段的5'磷酸基团，防止片段的自身环化，从而提高克隆效率。在RNA研究中，热敏磷酸酶可以用于去除RNA末端的磷酸基团，帮助研究RNA的加工和修饰过程。此外，它还被用于蛋白质的去磷酸化研究，帮助科学家了解蛋白质的修饰状态和功能调控。

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