它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。
白细胞介素 - 12(IL - 12)是一种重要的免疫调节细胞因子,在人体免疫系统中发挥着关键作用。它主要由抗原呈递细胞(APCs)如树突状细胞、巨噬细胞和B细胞产生,参与调节T细胞和自然杀伤(NK)细胞的活性,从而增强免疫反应。 IL - 12的生物学功能 IL - 12的主要功能是促进T细胞的分化和活化,特别是诱导初始T细胞向Th1细胞分化。Th1细胞分泌的干扰素 - γ(IFN - γ)和肿瘤坏死因子 - α(TNF - α)等细胞因子,能够增强巨噬细胞的杀菌能力,促进细胞毒性T细胞(CTLs)的发育,从而有效清除细胞内病原体。此外,IL - 12还能激活NK细胞,增强其细胞毒性,使其能够更有效地识别和杀伤肿瘤细胞和病毒感染的细胞。 重组人IL - 12(HEK 293 - expressed)的应用 重组人IL - 12是通过基因工程技术,利用人胚肾293细胞(HEK 293)表达系统生产的。这种表达系统具有高效表达、稳定性和生物活性高的优点,能够生产出与天然IL - 12具有相似生物活性的重组蛋白。
科学家们正在探索更长效的Exendin-4类似物,以减少给药频率,提高患者的依从性。
在人体的代谢舞台上,有一种由脂肪细胞分泌的激素——脂联素(Adiponectin),它在维持代谢平衡和促进健康方面发挥着关键作用。脂联素主要由脂肪细胞产生,其在血液中的水平与多种代谢过程密切相关,包括葡萄糖代谢、脂肪分解和炎症反应调节。 脂联素的表达和分泌受到多种因素的调控,包括饮食、运动和遗传因素。研究表明,脂联素水平的升高通常与较低的体重和较好的代谢健康状态相关。相反,肥胖和代谢综合征患者的脂联素水平往往较低,这表明脂联素在调节能量平衡和代谢健康中起着重要作用。 在实验室中,为了深入研究脂联素的功能,科学家们利用中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)来表达人类脂联素(Adiponectin, Human)。CHO细胞系因其稳定的生长特性和高效的蛋白表达能力,被广泛用于生产重组蛋白。通过在CHO细胞中表达人类脂联素,科学家们可以获取大量纯化的脂联素蛋白,用于研究其在细胞信号传导、代谢调节和疾病治疗中的作用。 脂联素通过与细胞表面的受体结合,激活一系列信号通路,从而调节葡萄糖摄取、脂肪分解和炎症反应。它能够增强胰岛素敏感性,减少脂肪组织中的炎症,从而降低患2型糖尿病和心血管疾病的风险。
建议使用2.0%-2.5%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。
在分子生物学的工具箱中,耐热核糖核酸酶H(Thermostable RNase H)以其独特的耐高温特性和精准的RNA切割能力,成为一种极具价值的酶。它不仅在基础研究中发挥重要作用,还在生物技术应用中展现出巨大的潜力。 耐热核糖核酸酶H是一种能够特异性识别并切割DNA-RNA杂交体中RNA链的酶。与普通的核糖核酸酶H相比,它具有显著的耐高温特性,能够在高温环境下保持稳定的活性。这种特性使得它在需要高温处理的实验中表现出色,例如在聚合酶链式反应(PCR)和逆转录PCR(RT-PCR)等实验中,耐热核糖核酸酶H可以在高温条件下去除RNA模板,从而提高反应的特异性和效率。 在分子生物学研究中,耐热核糖核酸酶H的应用非常广泛。例如,在研究基因表达调控时,科学家们常常需要精确地去除RNA模板,以便进一步分析DNA序列。耐热核糖核酸酶H能够在高温下高效地完成这一任务,避免了RNA模板在高温条件下的降解问题。此外,在基因编辑技术中,耐热核糖核酸酶H也可以用于去除RNA引导序列,从而提高基因编辑的准确性和效率。 耐热核糖核酸酶H的耐高温特性源于其独特的蛋白质结构。
dCTP(脱氧胞苷三磷酸)是DNA合成中的关键核苷酸之一,广泛应用于多种分子生物学实验
Protein G(蛋白G)是一种从金黄色葡萄球菌中提取的蛋白质,因其强大的免疫球蛋白结合能力而被广泛应用于生物医学研究。它能够特异性地结合免疫球蛋白G(IgG)的Fc段,从而在免疫分析和蛋白质纯化中发挥重要作用。 Protein G的功能与特性 Protein G的主要功能是结合IgG的Fc段。这种特异性结合使得Protein G在免疫分析和蛋白质纯化中具有广泛的应用。Protein G能够与多种物种的IgG结合,包括人类、小鼠、大鼠和兔子等,这使得它在多种实验中都能发挥作用。 Protein G的结合特性使其在蛋白质纯化中非常有用。通过将Protein G固定在琼脂糖珠或其他载体上,可以制备出高效的免疫球蛋白纯化柱。这种纯化柱能够特异性地捕获IgG,从而实现高纯度的蛋白质分离。此外,Protein G在免疫沉淀和免疫印迹(Western Blot)中也广泛应用,能够提高实验的特异性和灵敏度。 Protein G在生物医学研究中的应用 Protein G在生物医学研究中具有多种应用,特别是在免疫分析和蛋白质纯化方面。
它不仅在骨骼生长和修复中展现出巨大的潜力,还为未来的再生医学提供了新的方向。
T4 DNA连接酶是一种在分子生物学中不可或缺的工具酶,广泛应用于基因工程和DNA操作中。它最初从T4噬菌体感染的大肠杆菌中分离出来,能够催化双链DNA、RNA或DNA/RNA杂合链中相邻核苷酸的磷酸二酯键形成。 工作原理 T4 DNA连接酶的作用机制包括三个关键步骤: 酶-AMP复合物形成:T4 DNA连接酶首先与ATP结合,将ATP的腺苷酸部分转移到酶的赖氨酸残基上,形成酶-AMP中间体。 DNA末端腺苷化:酶-AMP复合物识别DNA末端的5'-磷酸和3'-羟基,将AMP转移到DNA的5'-磷酸末端。 磷酸二酯键形成:3'-羟基攻击5'-磷酸末端,形成新的磷酸二酯键,从而完成DNA片段的连接。 应用 T4 DNA连接酶在分子克隆中具有多种应用: 黏性末端连接:通过限制性内切酶产生的黏性末端,T4 DNA连接酶可以高效地将DNA片段与载体连接,确保目的片段以正确的方向插入。 平末端连接:虽然连接效率较低,但T4 DNA连接酶也可以用于平末端DNA片段的连接。 RNA修复与连接:它还能修复双链RNA或DNA/RNA杂合链中的单链缺口,用于RNA检测和修复。
这些变体不仅具有更高的耐热性,还能够适应不同的反应条件,满足各种实验需求。
白细胞介素 - 7(IL - 7)是一种重要的细胞因子,在小鼠的免疫系统中发挥着关键的调节作用。它主要由非淋巴样组织中的间质细胞产生,对于小鼠 T 细胞和 B 细胞的发育、增殖以及存活有着不可或缺的影响。 在小鼠体内,IL - 7 通过与特定的受体结合发挥作用。其受体主要由 IL - 7Rα链和共同γ链组成,这种受体广泛存在于早期 T 细胞和 B 细胞前体上。在 T 细胞发育过程中,IL - 7 促进前 T 细胞的增殖和分化,帮助它们从骨髓迁移到胸腺,并在胸腺内完成成熟过程。对于 B 细胞而言,IL - 7 能够刺激前 B 细胞的增殖,支持其早期发育阶段。 在实验研究中,重组小鼠 IL - 7(His,Mouse)的应用非常广泛。通过基因工程技术,利用表达系统生产的重组小鼠 IL - 7,具有与天然 IL - 7 相似的生物活性。它常被用于小鼠模型的研究中,以探索免疫系统的发育机制、免疫细胞的功能调控以及免疫相关疾病的发病机制。例如,在研究小鼠 T 细胞介导的免疫反应时,重组小鼠 IL - 7 可以用于体外培养 T 细胞,促进其增殖和活化,从而更好地理解 T 细胞在免疫应答中的作用。
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