已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳,无需额外处理。
T3 DNA连接酶是一种ATP依赖型的双链DNA连接酶,来源于T3噬菌体。它能够催化双链DNA中相邻的5'磷酸和3'羟基之间形成磷酸二酯键,广泛应用于分子克隆和基因工程。 工作原理 T3 DNA连接酶通过ATP提供能量,连接双链DNA的黏性末端和平末端。它对A/T突出末端的连接效率高于C/G末端,尤其在高盐环境下表现出色。在反应体系中加入PEG 6000可以显著提高其对平末端的连接效率。 特点 高盐耐受性:与T4 DNA连接酶相比,T3 DNA连接酶对NaCl的耐受性更高,能够在1.0 M NaCl或KCl的条件下保持95%的活性。 高效连接:对A/T突出末端的连接效率高于C/G末端。 反应条件:最佳反应温度为25℃,反应缓冲液中通常含有ATP、MgCl₂和PEG 6000。 应用 T3 DNA连接酶广泛应用于以下领域: 分子克隆:用于黏性末端和平末端DNA片段的连接。 定点突变:通过连接特定的DNA片段实现基因突变。 高盐体系连接:适用于需要高离子浓度的实验。 RNA连接:能够连接DNA和RNA杂合双链,用于生成DNA-RNA和RNA-DNA融合链接。
科学家们对BMP-7的研究不断深入,揭示了其在细胞信号传导中的复杂机制。
TAFA-2(也称为FAM19A2)是一种趋化因子样家族成员,属于TAFA家族。这个家族由五个高度同源的基因组成,编码小的分泌蛋白。TAFA-2蛋白含有保守的半胱氨酸残基,与CC趋化因子家族成员MIP-1α有远缘关系。它主要在大脑的特定区域表达,被认为可能作为大脑特异性的趋化因子或神经因子,调节免疫和神经细胞。 研究表明,TAFA-2在小鼠中对神经元的存活和神经生物学功能至关重要。此外,TAFA-2还可能参与调节食物摄入和代谢活动。在小鼠实验中,向第三脑室注射TAFA-2可以显著增加食物摄入量和进食次数,同时提高呼吸交换率和能量消耗。 TAFA-2的表达不仅限于大脑,还在结肠、心脏、肺、脾、肾和胸腺等组织中检测到,但在中枢神经系统的表达水平远高于其他组织。尽管其具体功能仍在研究中,但TAFA-2作为神经营养因子的特性表明,它在神经保护策略和神经系统内基本过程的调节中具有潜在的相关性。 总之,TAFA-2作为一种神秘的生物信号分子,其在神经系统和代谢调节中的作用正逐渐被揭示,为未来的神经科学研究和临床应用提供了新的方向。
在胚胎发育的早期阶段,BMP-4起着至关重要的作用。它能够引导细胞分化,决定细胞的命运。
肠激酶(Enterokinase),也称为肠肽酶,是一种在哺乳动物小肠中发现的丝氨酸蛋白酶。它在蛋白质的消化过程中发挥着关键作用,尤其是在激活胰蛋白酶原方面。肠激酶能够特异性地识别并切割胰蛋白酶原的N端六肽,将其转化为活性的胰蛋白酶,从而启动蛋白质的消化过程。这种酶的活性对于肠道中蛋白质的分解和吸收至关重要。 肠激酶的功能 肠激酶的主要功能是激活胰蛋白酶原。胰蛋白酶原是一种无活性的酶前体,当它被肠激酶切割后,会释放出一个六肽,从而转变为活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶是一种重要的蛋白酶,能够进一步分解蛋白质,使其成为更小的肽段和氨基酸,便于肠道吸收。肠激酶的这种特异性切割作用是蛋白质消化过程中的关键步骤。 重组肠激酶的制备 在生物技术领域,肠激酶的重组蛋白被广泛用于研究和应用。通过基因工程技术,科学家们可以在大肠杆菌或其他宿主细胞中表达带有His标签的肠激酶(Enterokinase, His)。His标签是一种多组氨酸序列,可以用于通过金属螯合层析法纯化重组蛋白。这种纯化方法简单、高效,能够获得高纯度的肠激酶。 临床应用与研究 肠激酶在生物技术中的应用非常广泛。
稳定性强:在室温下稳定,耐光性强,可在酸性或碱性缓冲液中长时间保存。
10× DNA/RNA非变性上样缓冲液是一种用于核酸电泳的浓缩缓冲液,广泛应用于DNA和RNA的非变性凝胶电泳。它主要由甘油、溴酚蓝、二甲苯青等成分组成。这种缓冲液在稀释至1×后,比重较大,能使核酸样品在加样后迅速沉入凝胶孔中,同时其中的染料可以作为电泳指示剂。 优势 适用范围广:适用于双链DNA、单链DNA、RNA引物、小RNA及特定RNA的电泳。 操作简便:使用时只需将核酸样品与缓冲液按9:1的比例混合即可。 安全无污染:无RNase杂质污染,确保RNA样品的完整性。 使用方法 混合样品:将DNA或RNA样品与10×非变性上样缓冲液按9:1的比例混合均匀。 上样:将混合后的样品加入凝胶加样孔中。 电泳:根据实验需求进行电泳,观察染料迁移情况以判断电泳进程。 注意事项 防止核酸降解:操作过程中需使用无RNase的耗材,避免RNA降解。 避免反复冻融:建议分装保存,避免反复冻融影响缓冲液性能。 染色:可在样品或凝胶中预先加入核酸染料,或在电泳结束后对凝胶染色。 10× DNA/RNA非变性上样缓冲液凭借其高效、安全和操作简便的特点,已成为分子生物学实验中核酸电泳的常用工具。
此外,它还可能对阿尔茨海默病等神经退行性疾病具有潜在的治疗作用。
Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。 泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯
这种重组蛋白通过基因工程技术在细菌或酵母中生产,具有与天然GH相同的生物活性。
在人体免疫系统中,β-防御素1(BD-1,Beta-Defensin 1)是一种重要的抗菌肽,广泛存在于人体的黏膜和上皮细胞中。BD-1在维持黏膜屏障功能和抵御病原体入侵方面发挥着关键作用,堪称人体免疫防御的“天然卫士”。 BD-1的特性 BD-1是一种小分子阳离子肽,属于β-防御素家族。它由上皮细胞和黏膜组织中的多种细胞分泌,具有广谱抗菌活性,能够有效抑制细菌、真菌和某些病毒的生长。BD-1的抗菌机制主要通过破坏微生物的细胞膜,导致微生物死亡。此外,BD-1还具有调节免疫反应的作用,能够促进免疫细胞的活化和趋化。 BD-1的功能 BD-1在人体免疫防御中具有多种重要功能: 抗菌防御:BD-1能够直接杀灭多种病原微生物,包括革兰氏阳性菌和阴性菌,从而在黏膜表面形成第一道防线,防止病原体的入侵。 免疫调节:BD-1不仅具有直接的抗菌活性,还能够调节免疫反应。它能够促进免疫细胞的趋化和活化,增强免疫系统对病原体的清除能力。 黏膜屏障维护:BD-1在维持黏膜屏障功能方面发挥重要作用。它通过抑制病原体的黏附和侵入,保护黏膜上皮细胞免受感染,从而维护黏膜的完整性。
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